ICP-OES (Inductive Coupled Plasma- Optical Emission Spectrometry) is een robuuste, high-throughput techniek, waarmee de samenstelling en concentratie van elementen in vloeistof kan worden bepaald met behulp van plasma en een spectrometer. Het is een gevoelige meettechniek waarbij lage detectielimieten gehaald kunnen worden (figuur 1). Er worden 74 elementen simultaan bepaald waarbij het mogelijk is om later calibratiereeksen toe te voegen.
Figuur 1: Periodiek Systeem met detectielimieten
Reagentia
Geconcentreed salpeterzuur
ICP multi-element standard solution IV 1000 ppm
Onafhankelijk IWT controlemonster
Apparatuur
Gilson pipet 1000 µL
ICP-OES 9800 Shimadzu
Werkwijze
Maak van de 1000 ppm standaardoplossing een verdunningsreeks van 1 ,10 ,100, 1000 10000 en 100000 ppb en een blanco. Gebruik aangezuurd water met 1% geconcentreerd salpeterzuur.
Selecteer de gewenste database.
Voeg de standaardreeks toe aan je analysesequence. (Dit zijn inclusief de blanco 7 standaarden.
Meet de standaarden van laag naar hoog.
Meet het IWT controlemonster.
Meet de onbekende monsters.
Controleer de meetdata op interferenties. Selecteer desnoods een andere golflengte als calibratielijn.
Controleer de meetwaarden op betrouwbaarheid en voeg de uitkomst van het controlemonster in op de sheward kaart.
Uitwerking
Eerstelijncontrole
Eerstelijncontrole van de meetgegevens is erg belangrijk. Indien een van de controle's negatief beoordeeld wordt neem dan contact op met de apparatuurbeheerder.
Controleer de gewenste calibratielijnen op lineariteit.
Indien de controle inorde is dan kunnen de resultaten als betrouwbaar beschouwd worden. Gebruik geen data voor je onderzoek waarbij er niet voldaan is aan de eerstelijns controle! Voor de samenvatting van bovenstaande controles zie tabel 1.
Tabel 1: Overzicht met eerstelijncontroles
Controle
VOLDAAN j/n
Correlatiecoefficient R^2 > 0,95
j/n
Varriatiecoefficient tussen de metingen uit hetzelfde monster< 2%
j/n
Controle begin en eind duploverschil < 5%
j/n
Waarde controlemonsters binnen 2S grenzen
j/n
HPLC screening voor onbekende niet-vluchtige stoffen
Inleiding
Veel werzame stoffen van farmaceutische middelen zijn met Een HPLC methode te analyseren. Deze methode is een methode met een vrij lange kolom en een minder sterk eluens zodat het scheidend vermogen van de methode vrij groot is. De kans is dat groot dat er dan een goede scheiding is van onbekende componenten. De methode is isocratisch en duurt 35 minuten.
Reagentia
Acetonitril HPLC grade.
0,005 M Kaliumdiwaterstof fosfaatbuffer pH 4 (op pH gebracht met fosforzuur).
Referentiestoffen (Afhankelijk van de te onderzoeken stoffen.
Apparatuur
HPLC bestaande uit
Autosampler (partiele loopinjector)
LC pomp met lage druk gradient mogelijkheden.
Kolom oven
UV-Vis detector
Fluorescentie detector.
pH meter
HPLC methode
Revesed Phase C18 HPLC kolom 250 * 4,6 mm 5 μm
flow 1,0 ml/min
Eluens C Acetonitril
Eluens D Kalium diwaterstoffosfaat buffer pH 4
UV-Vis detector 230 nm
Fluorescentie λemissie 230 nm λexicatie 300 nm
Werkwijze
Zet de hplc aan en plaat de eluentiea onder de juiste kanalen.
Maak een projectmap aan in clarity en open het project
Draai de purgekraan een kwartslag open.
Purge kanaal C en daarna kanaal D. (Laat helemaal uitpurgen.)
Draai de purgekraan weer dicht.
Stel de HPLC in met de parameters zoals beschreven in de paragraaf Instellingen HPLC.
Save de methode en geef deze een logische naam
Verzend de methode naar de HPLC. De pomp begint te lopen en het syteem bouwt druk op
Het arrangement Sops is gemaakt met
Wikiwijs van
Kennisnet. Wikiwijs is hét onderwijsplatform waar je leermiddelen zoekt,
maakt en deelt.
Auteur
Freerk Dousma
Je moet eerst inloggen om feedback aan de auteur te kunnen geven.
Laatst gewijzigd
2025-02-10 13:08:58
Licentie
Dit lesmateriaal is gepubliceerd onder de Creative Commons Naamsvermelding 4.0 Internationale licentie. Dit houdt in dat je onder de voorwaarde van naamsvermelding vrij bent om:
het werk te delen - te kopiëren, te verspreiden en door te geven via elk medium of bestandsformaat
het werk te bewerken - te remixen, te veranderen en afgeleide werken te maken
voor alle doeleinden, inclusief commerciële doeleinden.
Leeromgevingen die gebruik maken van LTI kunnen Wikiwijs arrangementen en toetsen afspelen en resultaten
terugkoppelen. Hiervoor moet de leeromgeving wel bij Wikiwijs aangemeld zijn. Wil je gebruik maken van de LTI
koppeling? Meld je aan via info@wikiwijs.nl met het verzoek om een LTI
koppeling aan te gaan.
Maak je al gebruik van LTI? Gebruik dan de onderstaande Launch URL’s.
Arrangement
IMSCC package
Wil je de Launch URL’s niet los kopiëren, maar in één keer downloaden? Download dan de IMSCC package.
Wikiwijs lesmateriaal kan worden gebruikt in een externe leeromgeving. Er kunnen koppelingen worden gemaakt en
het lesmateriaal kan op verschillende manieren worden geëxporteerd. Meer informatie hierover kun je vinden op
onze Developers Wiki.
