Uitvoering

De elektroforese-apparatuur bestaat uit twee perspexbakjes (14 cm x 6 cm x 6 cm), bevestigd op een grondplaat elk voorzien van een 20 cm lange platina- draad (als elektrode) met aansluitklemmen. Als lijmmiddel kan chloroform gebruikt worden. Over de bakjes wordt een glasplaat (22 cm x 12 cm) ge­legd. Bij gebruik moet als afscherming een plastic bak over het geheel worden geplaatst, zie tekening hierboven.

Vul de elektroforesebakjes voor ongeveer de helft met de oplossing met pH = 6,5.

Knip stroken elektroforesepapier van 10 cm x 35 cm (het papier mag alleen met rubber handschoenen aan worden vastgepakt!) en breng de verschillende aminozuuroplossingen met pH = 6,5 met een pipetje in het midden van het elektroforesepapier naast elkaar aan. Stip één keer aan, zodat een vlekje van ongeveer 3 mm diameter ontstaat, zie tekening hieronder.

A = Lysine

B = glutaminezuur

C = alanine

D = mengsel van alanine, glutaminezuur en lysine

 

Droog de vlekken met de föhn; bevochtig het papier met de oplossing met pH = 6,5 door de uiteinden in de
oplossing te drenken. De opbrengpunten mogen niet in de oplossing komen.

Leg het papier op de glas­plaat van het elektroforesebakje. De uiteinden van het papier moeten in de oplossing hangen. Plaats de beschermkap over het elekroforeseapparaat en sluit de gelijkspanningsbron van 300 V (4- 8 mA) aan.

Laat de elektroforese 30 minuten duren (opmerking 1).

Droog het papier dan met de föhn; haal het vervol­gens door de ninhydrine-oplossing en droog nogmaals. Gebruik hierbij rubber handschoenen.

Herhaal het experiment met de oplossing met pH = 1,6. De elektroforesetijd is hierbij 45 minuten.

 

Opmerking 1.

Een geringe verplaatsing van alanine bij pH = 6,5 is een gevolg van elektro-osmose. Het water wordt ten opzichte van het papier enigszins positief geladen en beweegt naar de - pool waarbij het de opgeloste
stof meeneemt.