Uitvoering

Voer met de oplossingen van de aminozuren elektroforeses uit bij de verschillende pH waarden.

De elektroforesetijd is 30 - 40 minuten.

Bepaal het IEP  van lysine en alanine.

De elektroforese-apparatuur bestaat uit twee perspexbakjes (14 cm x 6 cm x 6 cm), bevestigd op een grondplaat elk voorzien van een 20 cm lange platina- draad (als elektrode) met aansluitklemmen. Als lijmmiddel kan chloroform gebruikt worden. Over de bakjes wordt een glasplaat (22 cm x 12 cm) ge­legd. Bij gebruik moet als afscherming een plastic bak over het geheel worden geplaatst, zie tekening hierboven.

Vul de elektroforesebakjes voor ongeveer de helft met de oplossing met pH = 4.

Knip stroken elektroforesepapier van 10 cm x 35 cm (het papier mag alleen met rubber handschoenen aan worden vastgepakt!) en breng de verschillende aminozuuroplossing met pH = 4 met een pipetje in het midden aan. Stip één keer aan, zodat een vlekje van ongeveer 3 mm  diameter ontstaat.

Droog de vlekken met de föhn; bevochtig het papier met de oplossing met pH = 4 door de uiteinden in de
oplossing te drenken. De opbrengpunten mogen niet in de oplossing komen.

Leg het papier op de glas­plaat van het elektroforesebakje. De uiteinden van het papier moeten in de oplossing hangen. Plaats de beschermkap over het elekroforeseapparaat en sluit de gelijkspanningsbron van 300 V (4- 8 mA) aan.

Laat de elektroforese 30 - 45 minuten duren.

Droog het papier dan met de föhn; haal het vervol­gens door de ninhydrine-oplossing en droog nogmaals. Gebruik hierbij rubber handschoenen.

Herhaal het experiment met de oplossing met pH = 5,6,7 en 8.

Bepaal het IEP van de gebruikte aminozuren.?