Er is een verband tussen de hoeveelheid stof en de hoeveelheid licht de geabsorbeerd wordt. Een kwantitatieve uitspraak over concentratie kan op verschillende manieren gedaan worden:
De wet van Lambert-Beer is als volgt:
Hierin is de molaire extinctiecoëfficiënt (in
),
is de concentratie (in
) en
is de weglengte van de lichtweg door het monster, in vrijwel alle standaardcuvetten is dit
.
Extincties optellen
Zijn er desondanks meerdere stoffen aanwezig in het monster dan is het mogelijk om de extincties op te tellen. Door dan bij verschillende golflengtes te meten is het alsnog mogelijk om de concentraties te bepalen.
Stel dat een mengsel componenten A en B bevat (met concentraties en
) en er wordt bij twee verschillende golflengtes (1 en 2) gemeten. Dan is de totale extinctie bij golflengte 1:
Bij golflengte 2 geldt:
Beide extincties: en
, worden gemeten, alle molaire extinctiecoëfficieënten zijn bekend en de weglengte is ook overal gelijk. Dit levert twee vergelijkingen met als enige onbekenden
en
, dus een oplosbaar stelsel van vergelijkingen. De concentraties kunnen nu berekend worden.