Werking PCR

Bekijk het onderstaande filmpje over de PCR zoals die wordt gebruikt door de GGD. 

 

https://www.youtube.com/watch?v=c07_5BfIDTw

Vragen PCR.

 

  1. Leg uit wat de functie van een DNA-primer is in PCR.
  2. Leg uit waarom het belangrijk is dat DNA-primer een specifieke sequentie detecteerd.
  3. Leg uit na hoeveel cycli de eerste target DNA strengen zijn gevormd.
  4. Voor PCR wordt Taq-polymerase gebruikt. Leg uit waarom taq-polymerase beter geschikt is voor PCR.

Vermeerderen monsters

Vaak bevatten monsters te kleine hoeveelheden RNA/DNA om direct mee te werken. Dankzij de PCR-techniek kan het DNA in een monster vermenigvuldigt en aangetoond worden.

Hiervoor worden eerst de twee strengen van het DNA van elkaar losgemaakt door het monster te verwarmen tot een temperatuur van ca 90-95C. Vervolgens worden stukjes DNA-primer aan de gescheiden ketens gebonden.

  1. In het midden van de DNA-keten komt de volgende basenvolgorde voor op de coderende streng:

   5’-AGTCTGCTCAGCAATCGGGCTATGTCGCGTTCG-3’

Met PCR kan dit stukje DNA worden vermenigvuldigd. Geef de sequenties van de primers die geschikt zijn voor het repliceren van de vetgedrukte sequentie en van de complementaire sequentie. Deze primers bestaan uit 5 basen. Geef zowel het 5’- en het 3’-uiteinde aan.

  1. Verklaar op microniveau dat door verwarmen de complementaire strengen van elkaar gescheiden kunnen worden, terwijl de ketens zelf in tact blijven

SARS-virus

Het genoom van een positief enkelstrengig RNA-virus, zoals het SARS-virus, kan direct dienen als messenger-RNA (mRNA) voor de codering van eiwitten in een gastheercel, de eiwitsynthese.

  1. We gaan weer uit van het eerst genoemde fragment in het RNA met de volgorde: GAA UCG GGU UCA.

Welke aminozuren kan bovenstaand fragment voortbrengen? Maak hierbij gebruik van Binas tabel 71G.

  1. ​Hoe heet het proces waarbij het mRNA-molecuul een nieuw eiwitketen vormt?

Antwoorden zijn te vinden onder het kopje antwoorden of via deze link.

Ga verder naar het onderdeel werking zelftest.