## Werkwijze

Standaardreeks amygdaline:

Maak met de amygdaline standaardoplossing van 100 microgram/ml een standaardreeks van 5; 10; 20; 40 en 50 microgram/ml

Amygdaline extractie (DUPLO):

- ​Maal 5 gram pitten in een blender.
- Weeg hiervan 2 gram af in een rondbodemkolf van 250 ml, voeg hier 50 ml ethanol en kooksteentjes aan toe.
- Plaats de rondbodemkolf in een mantelverwarmer, sluit een refluxkoeler aan de rondbodemkolf aan. Zet de mantelverwarmer aan op 78,5 graden Celsius voor 80 minuten. Zie afbeelding voor opstelling extractie.
- Filter het extract in een rondbodemkolf van 250 ml.
- Smeer een klein beetje vet rond de hals van de rondbodemkolf en plaats de rondbodemkolf aan de rotatie verdamper ( 70mBar, 35 graden Celsius) totdat alle ethanol is verdampt. (Rotatie verdamper staat in s3.36 in de zuurkast, handleiding ligt erbij) Let op dat de kolf genoeg draaiingen maakt dat de oplssing niet in kolf kookt.
- Voeg 10 ml diethyl ether toe aan het monster en laat dit overnacht verdampen in de zuurkast.
- Voeg 5 ml eluens toe aan het monster en breng dit over in een maatkolf van 50 ml
- injecteer dit in een vial met behulp van een PTFE-filter.

LET OP!

In geval dat er een vetlaag op het monster zichtbaar is na het toevoegen van het eluens, het monster in Bleckman centrifuge centrifugeren op de hoogste stand voor tien minuten. vervolgens de vetlaag afpipetteren en verwijderen.

Controlemonster:

- Meet het controlemonster in duplo mee met het monster.