De Kjeldahl methode is DE methode om eiwit (stikstof) of fosfor te bepalen in organische stoffen.
Deze methode bestaat uit 3 stappen:
Destructie
Om de stikstof vrij te maken uit de organische stof is het nodig om deze organische stof volledig te slopen.
De naam destructie geeft dat eigenlijk al wel aan. (destruction in het Engels)
De destructie gebeurt door zwavelzuur en waterstofperoxide toe te voegen aan het monster.
Je kunt hier ook een speciaal destructietablet voor gebruiken.
Vervolgens wordt het monster in een destructiebank gezet:
De destructiebuis met monster en chemicalien wordt in deze destructiebank gezet. In deze destructiebank wordt de temperatuur opgevoerd zodat de reactie beter verloopt. De stikstof (of fosfor) zal nu vrij worden gemaakt uit het organische monster. Het stikstof zal als NH4+ in de oplossing komen.
Tijdens deze destructie ontstaan er zeer corrosieve en giftige dampen. Deze kunnen niet zo maar door de zuurkast worden afgevoerd. De leidingen van het afzuigsysteem van de zuurkast zullen dit niet kunnen verdragen.
De dampen van de destructiebank worden afgevangen en via een slang naar de "scrubber" getransporteerd.
In deze scrubber worden de corrosieve, giftige dampen "schoongemaakt".
In de scrubber zit een grote hoeveelheid loog die de zure corrosieve dampen neutraliseerd.
Ook zit er een indicator in het reactievat van de scrubber. Zo kun je zien wanneer de oplossing verzadigd is.
Destillatie
Na de destructie van je monster volgt stap 2: De destillatie. Ook daarvoor wordt een specifiek apparaat gebruikt:
Deze destillator zorgt ervoor dat het NH4+ dat is gevormd tijdens de destructie wordt omgezet in NH3.
De destillator zorgt ervoor dat de NH3 wordt overgedestilleerd in een erlenmeyer waar men van te voren een oplossing van boorzuur heeft gedaan.
De overige stof wordt automatisch uit de destructiebuis gezogen en overgebracht in een afvalvat.
Na de destillatie heb je dus NH3 in een erlenmeyer zitten. Nu is het tijd voor stap 3: de titratie.
Titratie
De titratie gebeurt met HCl. Met een speciale indicator ( mengsel van methyleenrood en methyleenblauw in ethanol) kun je het omslagpunt goed bepalen.
De reactievergelijkingen
Tijdens de destructie:
•CxHyNz → x CO2 + ½H2O + zNH4+ (CxHyNz kan vlees zijn.. of haar.. elk organisch product)
Tijdens de automatische destillatie:
•NH4+ + OH- → NH3 + H2O
Na het destilleren in de erlenmeyer:
•H3BO3 + NH3 → NH4+ + H2BO3-
Tijdens de terug titratie:
•H2BO3- + H3O+ → H3BO3 + H2O